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5.目前常见的辅助生殖技术总结辅助生殖技术是指利用医疗辅助手段怀孕不孕夫妇的技术，可分为人工授精和试管婴儿技术及其衍生技术。
试管婴儿是一种使用该技术的体外受精胚胎移植的婴儿。世界上第一个试管婴儿的诞生被称为20世纪心脏移植成功后医学界的另一个奇迹，激发了世界上许多国家研究这一高科技技术的热潮。
辅助生殖的主要方法 人工授精人工授精是将精子以非性交方式放入女性生殖道，使精子与卵子自然结合，实现妊娠的一种方法。最早成功的人工授精治疗是约翰·Hunter在1790年为严重尿道下裂患者的妻子进行的配偶间人工授精。虽然已经200多年了，但它仍然是一种常用的有效和有效的怀孕援助技术。由于精液来源不同，人工授精分为夫精人工授精（AIH）和供精人工授精（AID）。两者的适应证都有所不同。
AIH适应症：
(1)性交障碍；(2)女性生殖道精子运行障碍；
(3)少，弱精症。
AID适应症：
(1)无精症；(2)男方有遗传病；
(3)夫妻之间的特殊血型或免疫不相容。
在进行供精人工授精治疗时，精子供应商必须选择健康、智力发育良好、无遗传病家族史的中青年。染色体变异、乙型肝炎、丙型肝炎、淋病、梅毒，特别是艾滋病（艾滋病毒）也必须排除。血型应与受影响的丈夫相同。精子供应应应冷冻6个月，复查艾滋病毒阴性。由于艾滋病毒感染的潜伏期约为6个月，诊断不易确定，因此精子供应一般应从精子库中获得。
无论是AIH还是AID，受精前精子都必须优先诱导能量治疗，这是宫内授精或体外授精的一项重要常规技术。其功能是去除含有抑制和影响受精成分的精浆，激活和诱导精子能量。在自然受精中，精子通过宫颈粘液和在输卵管等待卵子的过程中进行上述变化。临床处理采用离子洗涤与输卵管液相似的授精培养液培养相结合的方法，具体包括精子上游法和Percoll梯度离心法。前法相对简单，但精子回收率低，弱精子应采用后法。授精时间应在排卵前48小时至排卵后12小时之间进行。目前常用的授精部位是将精子注入宫颈，或在严格的无菌措施下注入宫腔。
体外受精-胚胎移植(IVF-ET)该技术是将从母亲身上取出的卵子放入培养皿中，加入优先诱导的精子，使精子和卵子在体外受精，发育成早期胚胎，然后移植回母亲的子宫，怀孕后分娩。因为胚胎在试管中发育了前两天，所以也被称为试管婴儿技术。
IVF-ET的建立始于美国华人科学家张明觉的开拓性研究。张明觉早年在中国接受教育，1945年开始在美国做兔子体外授精实验，五年后没有成功。但他将从兔子子宫中回收的受精卵移植到其他兔子子宫中，但他可以通过腹部怀孕生下小兔子。经过深入研究，张明觉推测，体内受精的精子必须在输卵管等待卵子的过程中激活自己的生理变化，这样才能使卵子受精。上述猜测是通过实验得到证实的。同年，澳大利亚学者阿斯蒂斯在实验中也发现了同样的现象，称为精子获能。国际生物学界将他们的研究成果命名为张·奥斯汀原理。张觉民认为，20世纪50年代以前，体外授精失败的原因是精子没有被激活获能。因此，在仔细研究了激活精子在体外获得能量的方法后，他在1959年与科学家Pincus的合作研究中成功实现了兔子的体外受精和胚胎移植，为人类试管婴儿的建立奠定了基础。1970年，英国胚胎学家Edwards与妇产科医生Steptoe合作，开始了人类体外受精和胚胎移植的研究。1977年，他们取出输卵管阻塞不孕患者Lesley的卵子，与丈夫的精子进行体外授精，然后将发育出来的胚胎移植回Lesley的子宫。1978年7月25日，Lesley终于生下了世界上第一个试管婴儿Louisebrown。到目前为止，人类试管婴儿技术已经正式建立。1985年4月和1986年12月，台湾省和香港诞生了两地第一个试管婴儿。1988年3月10日，大陆第一个试管婴儿也在北京医科大学第三医院张丽珠教授领导的生殖中心诞生。国际上使用的大多数新技术都是从IVF-ET衍生出来的。
IVF-ET适应症
(1) 输卵管阻塞。(2) 子宫内膜异位症伴有盆腔粘连或输卵管异常，使精子在盆腔内被巨嗜细胞吞噬。
(3) 男性轻度少精子症和弱精子症。
(4) 免疫性不育，阳性。
(5)原因不明不孕。
目前，在IVF-ET技术中，多采用控制性超排卵方法，即选择人类促性腺激素，增强和改善卵巢功能，使一个周期能有多个卵泡发育，回收多个卵供受精。为了获得更多的移植胚胎。然而，超排卵有时会导致卵泡早熟和质量差。
1991年，中山医科大学第一附属医院采用下丘脑促性腺激素激动剂（GnRH-a）喷鼻剂Buserelin进行降调节，共同应用促性腺激素，显著增加优势卵泡数量。在实施超排卵过程中，需要用阴道B超扫描监测卵泡发育的数量和大小，监测尿LH和血液激素的变化，以便及时调整用药，正确估计取卵时间，尽量适应黄体和内膜功能、妊娠发生和妊娠维持。
取卵，B超引导阴道穿刺取卵。这种方法不需要麻醉切口或膀胱，避免尿液对精子的伤害，优于腹腔镜或B超引导腹部取卵。
体外授精，将取得的卵泡液注入培养皿中，用肉眼快速识别含有卵细胞及其周围透明带和放射冠的卵冠丘复合物。解剖镜下确认卵细胞存在后，放入CO2培养箱培养4~8h，然后根据复合物的形态变化选择成熟卵细胞。根据每卵10~20万个精子的比例，将受精卵放入培养试管/容器中进行洗涤和优化。
胚胎移植，于取卵后48小时，胚胎发育成2~8个细胞阶段，或在取卵后72小时胚胎发育到8~16个细胞时植入子宫。后者更符合自然受精胚胎进入子宫的时间，在传统的体外培养条件下，只有最健康的胚胎才能活到3天，因此移植成功率较高。
据报道，共培养术的应用可以使胚胎在移植前培养到囊胚期，妊娠率高达50%。一次移植的胚胎数量应为2~3个。由于胚胎移植数量的增加，虽然妊娠率不按比例增加，但多胎率也会增加。与几组移植1~6胎数据相比，移植3个胚胎的妊娠率相对较高，而多胎率相对较低。
胚胎冷冻融化不仅需要人工智能治疗精子冷冻融化，在IVF-ET中由于超排卵的应用，卵泡循环回收，受精胚胎，移植后剩余也需要冷冻储存，如移植失败，可在下一个自然周期或人力资源周期移植，以提高妊娠率。此外，患者因超排卵引起的卵巢刺激综合征，为了防止妊娠加重病情，胚胎也可以冷冻，留给未来移植。胚胎冷冻的机制是超低温可以抑制细胞的新陈代谢，使生命进入休眠状态并保存下来。保存温度为-196℃，保存装置为液氮作为冷源的液氮罐。但在胚胎冷冻升温复苏过程中，当温区经过0℃~60℃时，如果冷却过快，细胞内液体中的水分会迅速结冰，细胞膜会因体积膨胀而破裂，导致细胞死亡；如果冷却过慢，细胞外液中的水分会先形成小冰晶，增加外液的渗透压，导致细胞内液体中的水分向外渗透，溶质浓度相对增加，从而导致细胞蛋白质的分解和变性，细胞也难逃死亡的厄运。因此，在胚胎冷冻融化中，必须选择合适的冷却升温速度，借助一些不仅能减少细胞内冰晶的形成，还能延缓细胞外液中溶质的浓度。
只有通过冷冻保护剂的作用，胚胎才能安全冷冻或恢复。目前常用的方法是慢速冷冻和快速复温。精子冷冻机制和冷冻融化原理如上。
胚胎移植监测移植后14天，晨尿HCG阳性为生化妊娠，显示胚胎植入发育正常。胎囊在移植4~6周内被发现，胚胎和心管搏动是临床妊娠。
胚胎移植并发症主要包括流产、宫外孕、多胎妊娠、卵巢过度刺激综合征(OHSS)。
随着对影响妊娠成功因素的深入研究和相应技术环节的改进，预计IVF-ET妊娠率将提高。
卵泡浆内单精子显微注射(ICSI)
ICSI也就是所谓的第二代试管婴儿技术该技术是在男性精子数量不足、功能异常导致受精障碍、透明带部分切除和透明带下授精的基础上发展起来的。
1992年，Palerme报道了第一个用该技术授精的试管婴儿。该技术又称第二代试管婴儿，其操作方法是选择一个形状正常、运动缓慢的精子，而不需要进行精子诱导和获能处理。该方法用注射针挤压精子尾部，轻轻擦拭细胞质膜，诱导精子从擦伤点释放精子细胞质体因子激活卵细胞。卵细胞的激活对ICSI的正常受精非常重要，然后将精子按尾部顺序吸入注射针，然后通过显微操作将精子注入卵浆，即完成受精。其他技术环节与传统的试管婴儿相同。对于精子不通的患者，可以进行附睾穿刺。如果吸出物中没有精子，则从睾丸中分离精子，或取精细胞激活。
ICSI适应症为：
严重少、弱精子症、输精管阻塞、先天性双侧输精管缺陷和输精管结扎后儿童伤亡，与输精管失败或不匹配的人一致。
ICSI是治疗男性不育症的有效方法，但目前研究表明，严重程度较小，弱精子症是由染色体镶嵌异常引起的，先天性双侧输精管缺陷通常与囊性纤维膜传导基因突变有关，两者都是遗传性疾病，治疗前应告知遗传风险，妊娠后详细产前诊断，异常终止妊娠，或胚胎移植前遗传诊断（PGD），筛选优质胚胎移植。
胚胎植入前遗传学诊断(PGD)该方法又称第三代试管婴儿，是指在IVF-ET胚胎移植前，对胚胎的遗传物质进行分析，诊断是否有异常，筛选健康胚胎移植，防止遗传疾病传播的方法。取4~8个细胞胚胎的一个细胞或受精前后的第一个卵子和二极体。取样不影响胚胎发育。采用单细胞DNA分析法进行检测，一种是聚合酶链反应(PCR)，检测男女性别和单基因遗传病；另一种是荧光原位杂交(FISH)，检测性别和染色体疾病。早在1964年，Edwards就提出了PGD的想法。
1989年，Handysideah首先成功地将PGD应用于临床实践，利用PCR技术扩大Y染色体的特定基因，并将诊断为女性的胚胎移植到子宫中，以获得妊娠成功。一开始，PGD使用PCR或FISH检测性别，选择女性胚胎移植，帮助有风险的血友病A，进行性肌营养不良等X连锁遗传疾病后代的夫妇。然而，根据遗传规律，这种方法无疑否认了健康男孩的出生，允许携带者的女孩繁殖，并不能切断致病基因的传播。
1992年，美国首次报道了PCR成功检测囊性纤维，并通过胚胎筛查生下了一个健康的婴儿。之后，建立了α-1-抗胰岛素缺乏症、家庭黑色性痴呆、色素沉着视网膜炎等单基因遗传疾病的PGD检测方法，PGD进入了单基因遗传疾病的检测和预防阶段。
1993年以后，由于晚婚晚育增加了高龄妇女数量，45岁以上妇女染色体异常率高，自然妊娠容易分娩18-3体和21-3体愚蠢儿童，因此PGD的工作热点转向了染色体疾病的检测和预防，并使用FISH进行检测。由于采样多为第一极体，筛选为未授精卵，必须在单精子细胞浆中注射，培养成胚胎后移植。据统计，中途停止发育的胚胎染色体异常率为70%，因此选择染色体正常的胚胎移植也可以提高IVF-ET的成功率。
理论上，所有可以诊断的遗传疾病都应该通过PGD来防止，但由于目前的技术条件，PGD的适应性仍然有一定的局限性。优生学是世界上共同关注的问题。随着分子生物技术的发展和更多遗传疾病基因的确定，相信一些准确安全的遗传诊断技术会不断出现，PGD技术会越来越完善，更好地造福人类。
供卵试管婴儿供卵试管婴儿最早由Trounson等于1983年首次报道妊娠成功。
供卵试管适应证为：
(1)卵巢功能衰竭或无卵巢。(2)女性有遗传性疾病或染色体异常。
供卵人的选择应符合：
(1)35岁以下，曾生过一胎。(2)无家族遗传史、精神病史，排除乙肝、丙肝及性传播疾病，特别是HIV阳性者。
(3)智力，外表好。
(4)血型与受者一致。
与常规IVF-ET相比，IVF-ET在技术上增加了两个重要环节。
1、供卵者和受供者的月经周期必须同步调整。方法是对于无卵巢功能的患者，巢功能的患者进行类固醇激素替代治疗（HRT），促进子宫内膜周期变化，具有接受胚胎植入的能力，诱导内源性LH峰和子宫内膜雌激素受体的产生，改善人体内分泌环境。对于有卵巢功能的患者，在HRT治疗前，应先用促性腺激素释放激素类似物或增强剂GnRH-A降调节。在HRT治疗周期中，需要进行血清激素测定、子宫内膜活检、B超多普勒监测，了解子宫内膜的容受性，以调节剂量，使子宫内膜具有良好的容受性
2、维持妊娠。捐献给患者丈夫的精子进行体外授精发育和胚胎移植后，患者必须逐步增加HRT给药。为了维持妊娠，直到受者自身胎盘功能建立。捐献卵子IVF-ET妊娠率较高，部分数据报道达到44.9%。捐献卵子给患者丈夫的精子进行体外授精发育和胚胎移植后，应逐渐增加HRT给药物。以维持妊娠，直到受者自身胎功能建立。除了治疗适应症患者外，还可以为胚胎、子宫内膜和类固醇激素的相互作用提供人类模型，具有广阔的临床应用前景。
第三方辅助生殖第三方辅助生殖也就是常说的代怀孕，用于子宫切除术后或子宫破裂和严重子宫粘连患者。第三方辅助生殖技术的原理与供卵IVF-ET相同，但供卵者为患者，受卵者为第三方辅助生殖者。由于概念意识的原因，我国尚未认同这一技术。
心肌炎可对各年龄段、不同性别人群发起“无差别攻击”，不过20~40岁青壮年比老人、儿童更易中招。病毒进入血液后，随着血液循环到达心脏，如果病人的抵抗力弱，就有可能引起心肌炎。病毒性心肌炎是指病毒感染引起的心肌局限性或弥漫性的急性或慢性炎症病变，属于感染性心肌疾病。
